质谱流式技术(CyTOF)结合了传统流式技术高效的单细胞研究能力和飞行时间质谱的全谱高分辨率优势,采用金属标记抗体对样本进行标记,理论上最多可提供135个检测通道,并且克服了传统流式荧光发射基团光谱重叠的问题,实现单细胞水平的高通量分析。
质谱流式技术采用金属标记的抗体识别细胞表面或胞内的抗原,标记后的细胞经雾化后进入电感耦合等离子体矩管中进行离子化,离子云随后被传输至飞行时间质量分析器中,检测器依次记录各种金属离子到达的时间,检测出细胞中各种标签金属的含量,最终形成不同的金属离子信号峰。检测产生的高维数据通过分类、聚类和降维算法进行处理,结果可以反映基于靶蛋白丰度的各种细胞群体的表型和功能。
技术特点:
1. 上百种独立检测通道,理论上最多可以同时检测135个蛋白
2. 金属元素标签,每个标签之间不会互相影响
3. Barcoding技术
4. 超快TOF-MS
5. 高维数据可视化分析软件
质谱流式应用
检测
表面标志物
细胞因子
转录因子
信号通路
应用
免疫分型
稀有亚群鉴定
生物标志物发现
患者分层
疗效预测
疾病进展监测
T细胞抗原筛选
疫苗研发等